GDF-8 1mg/flacon promovează în mod semnificativ masa musculară și îmbunătățirea forței

Introducere a miezului GDF-8 1mg/sticlă

Miostatină|Transforming Growth Factor- Membru al superfamiliei 1 mg/fiolă

Nume generic: Miostatină (Factor de diferențiere a creșterii-8)

nume englezesc: Miostatină (Factor de diferențiere a creșterii 8, GDF-8)

Structura proteinei: Peptidele mature sunt homodimeri, fiecare lanț conținând aproximativ 110 aminoacizi.

Greutate moleculară: Aproximativ 25 kDa (forma monomer)

Puritate: mai mare sau egal cu 90% (SDS-PAGE/HPLC)

Conţinut: 1 mg/sticlă

Aspect: Pulbere albă liofilizată

Depozitare: Congelați la -80 de grade, protejați de lumină și depozitați într-un loc uscat.

Ghid de utilizare și depozitare

GDF-8 (miostatina):

GDF-8, un membru al superfamiliei factorilor de creștere transformanți-, este exprimat în principal în mușchiul scheletic. Ca regulator negativ al creșterii musculare, controlează cu precizie masa musculară scheletică prin legarea de calea de semnalizare a receptorului activinei IIB/ALK4/5, inhibând proliferarea și diferențierea mioblastelor. Ca o proteină cheie de semnalizare a feedback-ului negativ pentru creșterea musculară, joacă un rol central în modelele experimentale de dezvoltare musculară, regenerare, atrofie (cum ar fi cașexia cancerului și sarcopenia legată de vârstă-) ​​și boli metabolice. În comparație cu factorii pro-anabolism, caracteristicile sale regulatoare negative oferă o perspectivă unică pentru înțelegerea mecanismelor de echilibru ale homeostaziei musculare.

Datorită rolului său de reglare negativ crucial în creșterea musculară, GDF-8 este utilizat pe scară largă de către cercetătorii în biologia musculară, medicina regenerativă, fiziologia exercițiilor fizice și boli metabolice. În comparație cu modelele knockout ale genelor, forma sa recombinată de proteine ​​oferă un instrument experimental standardizat pentru controlul precis al intensității semnalelor inhibitoare, studiind doza-răspunsul și procesele de timp in vitro și in vivo. Aplicarea sa în studiile privind tulburările de regenerare musculară, modelele de atrofie musculară și cercetările metabolice legate de interacțiunile mușchi-grăsimi oferă o bază pentru evaluarea potențialelor strategii de intervenție care vizează calea GDF-8.

Aplicații GDF-8:

Ca un regulator negativ clasic al creșterii musculare, este utilizat în modele in vitro și in vivo pentru a simula sau a îmbunătăți cu precizie semnalele inhibitoare ale creșterii musculare, studiind astfel efectele sale inhibitoare asupra proliferării mioblastelor, diferențierii, masei musculare scheletice și funcției. Este folosit în principal pentru a explora mecanismele moleculare ale atrofiei musculare, regenerării musculare afectate și interacțiunile dintre mușchi și alte țesuturi (cum ar fi grăsimea și oasele).

Este utilizat pe scară largă în modele de atrofie musculară, studii ale funcției mioblastelor/celule satelit, experimente de regenerare musculară și cercetări asupra tulburărilor metabolice musculare legate de obezitate și diabet. Forma sa standardizată de proteină recombinată oferă un instrument de cercetare de bază pentru evaluarea noilor medicamente anti-atrofie musculară, studierea bazei moleculare a adaptării la efort și explorarea strategiilor terapeutice care vizează semnalizarea GDF-8.

Metode de utilizare și depozitare

1. Reconstituire și pregătire:

Solvent recomandat:

Solvent preferat: Se diluează soluția de acid acetic cu pH 4,0-5,0 (de exemplu, acid acetic 20 mM).

Purtător de chei: Trebuie adăugată proteina purtătoarela solvent și toți diluanții;se recomandă o soluție sterilă de acid acetic care conține 0,1% albumină serică bovină (BSA).

Diluarea soluției de lucru: Se diluează la pH fiziologic cuPBS steril sau mediu de cultură celulară care conține 0,1-1% BSA.

Absolut interzis: Este strict interzisă dizolvarea directă sau diluarea proteinei folosind apă pură, PBS neutru sau soluții fără proteine ​​purtătoare,în caz contrar, vor avea loc agregarea, precipitarea și inactivarea proteinelor ireversibile.

Procedura standard de pregătire:

Prepararea solventului:

Se prepară o soluție sterilă de acid acetic de 20 mM care conține 0,1% BSA (sau proteină purtătoare de puritate mai mare) și se filtrează printr-o membrană de filtru de 0,22 μm.

Solventul trebuie să fie pre-răcit pe gheață înainte de utilizare.

Procedura de reconstituire:

Efectuați procedura pe gheață. Adăugați 1,0 ml de solvent acid purtător pre-răcit într-un flacon de 1 mg.

Utilizați o micropipetă pentru a injecta proba foarte încet de-a lungul peretelui sticlei, evitând generarea de bule de aer sau impactul direct asupra prăjiturii liofilizate-.

Puneți flaconul pe gheață șirotiți-l ușor pe orizontală timp de 5-10 minutepână când pulberea este complet dizolvată.Nu agitați, nu agitați, nu suflați sau agitați violent.

Concentrația finală: 1 mg/mL (aproximativ 40 μM) soluție stoc acidă.

Dozare și diluare în gradient:

Distribuiți imediat în doze unice de 2-10 μL folosind tuburi de centrifugă silanizate cu adsorbție scăzută pe gheață.

Când diluați, mai întâi diluați soluția stoc acidă de cel puțin 100 de ori cu PBS sau mediu de cultură care conține 0,1-1% BSA pentru a neutraliza pH-ul. De exemplu, luați 1 μL de soluție stoc și adăugați-l la 99 μL de PBS care conține 1% BSA pentru a obține o soluție intermediară de 10 ug/mL.

Soluția intermediară este apoi diluată până la concentrația finală de lucru. Toate etapele de diluare sunt efectuate pe gheață.

Etichetat clar: GDF-8, concentrație, pH, data preparării, numărul lotului, temperatura de depozitare.

Referința concentrației de lucru:

Experimente cu celule in vitro: Intervalul de concentrație utilizat în mod obișnuit este de la 0,1 la 5 ug/mL (aproximativ 4 la 200 nM), care trebuie optimizat în funcție de tipul de celulă și scopul experimental.

Experimente in vivo pe animale: Doza trebuie determinată strict în funcție de model și calea de administrare (de exemplu, intraperitoneală, intramusculară, intravenoasă) pe baza literaturii de specialitate. Intervalul utilizat în mod obișnuit este în intervalul ug/kg până la mg/kg șitrebuie efectuate experimente preliminare.

Exemplu de calcul: Pentru a prepara o soluție de lucru de 100 ng/mL, luați 1 μL din soluția intermediară de 10 ug/mL și adăugați-o la 100 μL de mediu de cultură.

Puncte cheie de reținut:

Temperatură scăzută și blândețe: Întregul proces trebuie efectuat pe gheață, iar mișcările trebuie să fie extrem de blândepentru a preveni denaturarea proteinelor.

Dizolvarea forțată a acidului: Trebuie dizolvat într-o soluție tampon acidă (pH 4-5), care este crucial pentru menținerea solubilității și activității sale.

Proteine ​​purtătoare forțate: Dizolvarea și diluarea trebuie efectuate folosind soluții care conțin proteine ​​purtătoare precum BSApentru a preveni adsorbția și agregarea.

Ciclul de înghețare-decongelare este strict interzis: Ciclurile repetate de îngheț-decongelare sunt strict interzise; soluția trebuie distribuită dintr-o singură mișcare. Soluție de lucru diluatănu trebuie depozitate; trebuie preparat și folosit imediat.

Observarea stării: După reconstituire, soluția trebuie să fie limpede și ușor opalescentă. Prezența oricărei materii floculente, particule sau turbiditate indică faptul că proteina s-a denaturat și s-a agregat, iar soluția trebuie aruncată.

2. Condiții de depozitare:

Pulbere liofilizată nereconstituită:

Doar depozitare: -80 de grade (congelare). Nu depozitați la -20 de grade.

Perioada de valabilitate: 12 luni la -80 grade .

Protejați cu strictețe de lumină: Depozitați în punga originală din folie de aluminiu rezistentă la lumină-, cu un desicant în interior.

Soluție reconstituită:

Dozare imediată:Distribuireatrebuie finalizat în 5 minutedupa reconstituire.

Reambalat și congelat: Poate fi depozitat doar la -80 de grade, termen de valabilitate maxim 2 săptămâni, nu este recomandat pentru depozitare.

Depozitarea este strict interzisă: Soluția de lucru diluată trebuiesă nu fie depozitatși trebuie păstrat pe gheață și folosit în 4 ore.

Conditii de transport:

Trebuie transportatsubgheață uscată(-78 de grade).

Ambalajul trebuie să aibă suficientă gheață carbonică și izolație pentru a se asigura că nu se dezgheță pe tot parcursul procesului.

3. Stabilitate și standarde de procesare:

Stabilitate fizico-chimica:

Este sensibil la pH șieste stabil și solubil numai la pH acid (4,0-5,0). Se agregează și precipită cu ușurință la pH neutru și alcalin.

Este extrem de sensibil la stresul termic și mecanic (vortex, oscilație, barbotare) și ciclurile repetate de îngheț{0}}decongelare.

Este sensibil la adsorbția de suprafață, așa că trebuie să utilizați o proteină purtătoare și un recipient cu{0}}adsorbție scăzută.

Menținerea bioactivității:

patru principii: "dizolvarea acidă, protecția purtătorului, blândețea-la temperatură scăzută și interzicerea strictă a ciclurilor de îngheț-dezgheț".

Nevoieorice, va rog sa contactatiS.U.A

Tag-uri populare: gdf-8 1mg/flacon promovează în mod semnificativ masa musculară și îmbunătățirea forței, China gdf-8 1mg/flacon promovează în mod semnificativ masa musculară și îmbunătățirea forței producători, furnizori, fabrici